大肠杆菌感受态细胞转化能力的影响因素

摘要 : 探讨了大肠杆菌菌株、细菌生长状态、转化溶液、抗冻剂及保存时间、质粒长度和 纯度对感受态细胞转化能力的影响。结果表明，以100 mmol/L CaCl₂为缓冲液，采用经活化培养的A ₆₀₀为0.55的TG1制备的感受态细胞，在冰上放置6 h后转化，所得转化率最高，可达2×10⁶～4×10 ⁷ cfu/mg DNA(pUC19)。随着质粒长度增加和纯度降低，转化率有所下降。若感受态细胞要保存备 用，以15%甘油为抗冻剂优于7% DMSO，但添加抗冻剂对转化率有抑制作用。贮于甘油的感受 态细胞在-70 ℃冻存两个月后仍有较理想的转化率。