骨髓间充质干细胞体内诱导分化为心肌细胞

摘要 : 观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells， MSCs)植入体内后，在心肌微环境诱导下分化为心肌细胞的能力。无菌条件下取出大鼠双侧股骨及胫骨，冲洗骨髓腔获得细胞，贴壁筛选法纯化MSCs，体外培养、扩增，4，6－二咪基－4-联苯基吲哚( 4，6-diamidino-2-phenylindole， DAPI)标记细胞，注入结扎冠脉左前降支所致心肌梗塞模型鼠的心肌组织。在不同时间点处死大鼠，获取心肌组织，采用HE染色和电镜技术对植入MSCs进行形态学观察和超微结构检测，荧光 免疫组化检测植入MSCs肌球蛋白重链(MHC)和心肌特异性抗原Cx43的表达，同时应用RT-PCR技术检测心脏早期发育基因NKx2.5 、GATA-4的表达。结果发现细胞标记效率为100%，通过连续 检测MSCs植入后细胞形态从无规则状态、幼稚细胞表型逐渐向成熟心肌细胞方向转化，植入细胞排列同正常肌纤维方向平行，且植入四周后电镜检测到闰盘的存在；两周出现 MHC的表达，后随时间延长表达逐渐增强。四周出现Cx43的表达，以后表达稳定，RT-PCR检测NKx2.5、GATA-4在一天即出现弱表达，两周～三周时表达最强，以后强度逐渐减弱。结果表明 MSCs在体内微环境条件下能够转化为心肌细胞。