叠氮钠、过氧化氢对SH-SY5Y细胞内硫氧还蛋白还原酶的影响

摘要 : 过度氧化应激是诱发许多神经退变病的重要因素。叠氮钠(NaN₃)是线粒体有氧呼吸链细胞色素c氧化酶 (COX)的特异性抑制剂，过氧化氢(H₂O₂释放氧自由基造成氧化损伤，两者都可以用于氧化应激情况下神经元损伤模型的建立。硫氧还蛋白还原酶( thioredoxin reductase，TR)特异性的还原氧化型的硫氧还蛋白(thioredoxin， TRx)，调节细胞中氧化还原的平衡。现以不同浓度NaN ₃或H₂O₂处理人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)，建立损伤模型。通过MTT法、形态学方法检测 SH-SY5Y细胞损伤程度。同时，通过Western blot定量法、免疫细胞化学法，检测损伤的SH-SY5Y细胞中TR含量的改变，观察TR在胞内的分布。实验表明，NaN ₃、H₂O₂均以浓度依赖方式损伤SH-SY5Y细胞；TR分布于SH-SY5Y细胞的胞浆，表明TR是一种分泌蛋白，损伤后 分布无明显变化。但一定浓度的NaN₃作用后3h，胞内TR 水平显著降低，即神经系统内呼吸链受损可抑制TR的表达，为神经退变病的防治提供了新的思路。