一种有效纯化低拷贝质粒DNA的改良硅藻土法

余宏傲　张岚岚　徐昌杰^*

浙江大学园艺系，农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室, 杭州310029

摘要 : 碱法制备的低拷贝质粒因含有大量杂质而无法获得有效的测序结果。为此，以纯 lDNA为样品，对硅藻土纯化DNA的方法进行了优化，表明硅藻土悬液的最佳用量是20 ml/mg lDNA，回收率达77.31%。应用此改良硅藻土法纯化一长为14 953 bp的低拷贝质粒pLZ14，所得质粒纯度达23.87%，比未纯化前提高了11.06倍。经纯化的pLZ14质粒测序信号强、无误认碱基，而未经纯化的质粒测序时信号弱、错误普遍存在。