FGF-2对人骨髓间充质干细胞增殖和向成骨细胞分化的影响

唐文洁^1,2　李玛琳¹　邱垂源²　陈琼玉²　李国辉²　李凌松³　洪　岸^2*

¹昆明医学院云南省天然药物药理重点实验室，昆明650031； ²暨南大学生物工程研究所，广州 510632；³北京大学干细胞研究中心，北京 100083

摘要 : 探讨体外培养条件下，成纤维细胞生长因子-2 (FGF-2)和地塞米松(Dex)对第7代人骨髓间充质干细胞(MSCs )增殖和向成骨细胞分化的作用以及两者联合使用的效应。 MSCs经含FGF-2或/和Dex的培养液作用后，于不同时间采用 MTT法测定细胞增殖情况；对硝基苯磷酸(pNPP)法测定碱性磷酸酶( ALP)活性；ELISA法测定骨钙蛋白(OC)含量；茜素红S染色法对沉积的钙盐进行染色。发现：⑴ FGF-2组细胞的生长速度为对照组的1.31倍，Dex/FGF-2组细胞的生长速度为FGF-2组的1.12倍。⑵ Dex组的ALP活性、OC含量和细胞外基质钙盐沉积分别为对照组的17.0倍、2.12倍和10.56倍，并能形成成熟的羟基磷灰石( HA)结晶和骨结节；FGF-2组的ALP活性比对照组降低了76.7% ，虽然OC含量、钙盐沉积增加，但不能形成成熟的HA结晶和骨结节； FGF-2对Dex诱导的ALP活性增加和HA结晶形成有拮抗作用。由此证明：⑴ FGF-2可促进MSCs的增殖，Dex对MSCs的增殖无明显作用；Dex 能增强FGF-2对MSCs的促增殖效应。⑵ Dex可使MSCs分化为成熟的成骨细胞，是一个有效的成骨细胞分化诱导剂； FGF-2可使MSCs分化为未成熟的成骨细胞；FGF-2拮抗Dex诱导 MSCs分化为成熟的成骨细胞