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一个新的人乙酰化酶MAK3的克隆、表达和纯化


汪慧强1,2 李 平2 翟琦巍1*
1中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所,上海 200031;2四川农业大学水稻研究所,成都611130
摘要 : 在对乙酰化酶GNAT家族进行研究分析的过程中,找到一个人 GNAT家族的新成员MAK3。MAK3含有一个保守的乙酰化酶结构域,并且不同物种中的 MAK3的蛋白质序列高度保守。通过半定量和定量RT-PCR检测了在不同组织中 MAK3的mRNA水平。并且把MAK3分别克隆到了真核和原核表达质粒中,通过免疫印迹技术证实了 MAK3的表达。还进一步用亲和层析的方法成功纯化了细菌中表达的 MAK3,并对纯化后的MAK3的酶活性进行了测定。