体外培养成人包皮成纤维细胞周期同步化效果检测

摘要 : 供体细胞和受体胞质周期协调性是核移植胚胎发育的关键， 对人成体细胞的细胞周期分布及其同步化效果进行探讨， 将为人治疗性克隆研究打下基础。结果发现: 80%~85%汇合生长成人包皮成纤维细胞G₀/G₁期细胞比例显著高于接种后第1天指数生长细胞及接种后第5天100%汇合生长细胞两组(67.0% vs 58.2%， 52.8%， P<0.05)， 指数生长状态下， 仍有58.2%的成人包皮成纤维细胞处于G₀/G₁期; 以0.2 μg/ml和2 μg/ml不同浓度阿菲迪霉素(aphidicolin， APD)处理成人包皮成纤维细胞24 h， 2 μg/ml APD组G₀/G₁期细胞比例显著高于0.2 μg/ml组和对照组(10% FBS)(82.9% vs 68.8%， 63.5%， P<0.05)， 2 μg/ml APD可有效的将成人包皮成纤维细胞同步于G₀/G₁期， 且培养液中添加10%、0.5%、0% FBS不同浓度血清对2 μg/ml APD G₀/G₁期同步化效果无显著影响(82.6% vs 81.8% vs 74.6%， P>0.05); 以血清饥饿培养法(0.5% FBS)进行成人包皮成纤维细胞同步化处理， 血清饥饿处理3 d组G₀/G₁期细胞比例显著高于0 d组(对照组) (71.8% vs 59.6%， P<0.05)， 血清饥饿培养3 d可有效将细胞同步于G₀/G₁期。因此， 2 μg/ml APD处理24 h和血清饥饿培养3
    d可有效将成人包皮成纤维细胞同步于G₀/G₁期。