小鼠3种α1，2岩藻糖转移酶基因的比较

摘要 : 利用RT-PCR方法克隆小鼠3种GDP岩藻糖：b-半乳糖苷α1，2-岩藻糖转移酶(α1，2-fucosyltansferase，α1，2-FT)基因编码区MFUT-I、MFUT-II、MFUT-III，序列分析结果表明MFUT-I、MFUT-II和MFUT-III间具有相当的同源性，且分别与人类H基因(78.4%)、Se基因(79.0%)和Sec1基因(74.9%)具有序列同源性。将3种基因编码区分别插入表达载体pcDNA3.1的多克隆位点，并将其分别转染于COS-7细胞，结果显示MFUT-I和MFUT-II基因转染后的COS-7细胞具有α1，2-FT活性，但在MFUT-III基因转染后的COS-7细胞中检测不到这种活性。应用Northern印迹杂交法研究基因在小鼠组织中的表达情况。证实MFUT-II可在多种组织中产生3.5 kb大小的mRNA转录产物，然而MFUT-I和MFUT-III分别只在附睾和睾丸中显著表达。Southern印迹杂交分析结果显示:基因MFUT-II仅为一个拷贝，而MFUT-I和MFUT-III可能存在2个拷贝。因此，MFUT-I、MFUT-II和MFUT-III分别为鼠的H基因、Se基因和Sec1基因。