山羊精原干细胞体外培养分化

摘要 : 探索山羊精原干细胞体外培养体系。收集2月龄关中奶山羊睾丸，一步酶法消化分 离曲细精管细胞，台盼兰检测平均存活率82.7%，以1×10 6个/ml接种含15%胎牛血清DMEM/F12培养瓶，37 ℃、5% CO2和饱和湿度条件下培养，4周后FBS逐渐降至10%。原代培养以多突 起和片状的睾丸体细胞铺壁生长为主，10天左右精原干细胞数量增加，可见二联体和四联体，3 周左右有鸟巢状和山脉状集落形成，碱性磷酸酶染色阳性，培养30天集落数不断增加，散在分布有 贴壁和漂浮精子，换液后精子丢失。挑取单集落重新接种铺壁的曲细精管体细胞饲养层后陆续有 精子细胞及精子形成，主要分布于集落周围。