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人脐静脉间充质干细胞的分离培养及生物学特性鉴定


张绪超* 陈惠芹 黄绍良* 魏 菁 黄 科 吴燕峰 包 蓉
中山大学附属第二医院干细胞研究中心,广州510120
摘要 : 为了对人脐静脉间充质干细胞(MSC)进行分离培养及其生物学特性鉴定。采用胶原 酶分步消化法获得人脐静脉间充质干细胞(hUVMSC2)并对其进行体外培养、形态学观察及绘制生 长曲线;利用条件培养基诱导法分析该细胞分别向成骨细胞和脂肪细胞分化能力;流式细胞术检 测细胞表面标志物CD54、CD105、CD29、CD166、CD44、CD31、CD34、CD49、CD106等表达 情况。结果该细胞形态为梭形或成纤维样,不表达内皮来源的vWF因子。在不同诱导条件下,该 细胞可分别向成骨细胞和脂肪细胞分化。hUVMSC2细胞表面表达CD54、CD105、CD29、CD166、 CD44等间质细胞黏附分子,不表达CD31、CD34、CD49、CD106等内皮或造血细胞相关标志物。 该细胞指数生长期倍增时间约为26 h,在添加bFGF条件下可迅速增殖,指数生长期倍增时间缩 短为16 h。研究证实人脐静脉内皮层下存在间充质干细胞,采用分步酶消化法可同时分别获得单 根脐静脉的内皮细胞和间充质干细胞。hUVMSC2间充质干细胞具有向脂肪细胞和成骨细胞分化潜 能并表达多种黏附分子。