miR-96-5p靶向调节FBXW7表达对舌鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响
魏卿1* 孙洋1 付爽2 邢硕3 竺庆晓2
该研究旨在探讨miR-96-5p靶向调节F-box和WD重复结构域7(FBXW7)表达对舌鳞状细胞癌(TSCC)细胞增殖、凋亡的影响。以RT-qPCR检测人TSCC中miR-96-5p及FBXW7的异常表达情况, 探究其与患者临床病理特征的相关性。体外培养人TSCC细胞系SCC15、CAL-27, 将其随机分为空白对照组、NC-miR-96-5p组、anti-miR-96-5p组、miR-96-5p组、anti-miR-96-5p+si-NC组、anti-miR-96-5p+si-FBXW7组, 分组转染后用RT-qPCR与Western blot检测细胞miR-96-5p及FBXW7表达情况; CCK-8与平板克隆形成实验检测细胞增殖情况; 流式细胞实验与Hoechst 33342/PI双染检测细胞凋亡情况; 免疫荧光染色检测细胞增殖与凋亡相关蛋白表达水平; 裸鼠实验检测miR-96-5p靶向FBXW7表达对TSCC实体瘤生长的影响。采用双荧光素酶报告基因与RNA免疫共沉淀(RIP)实验验证miR-96-5p对FBXW7的靶向调控作用。结果显示, 与配对癌旁组织相比, 人TSCC组织中miR-96-5p明显升高, 而FBXW7表达水平明显降低(P<0.05), 并与TSCC患者肿瘤大小、淋巴结转移和临床分期相关。与空白对照组相比, anti-miR-96-5p组miR-96-5p表达水平、细胞活力、克隆形成率、Ki67阳性表达量、Bcl-2/Bax值降低, 而FBXW7蛋白与mRNA表达水平、凋亡指数、凋亡率升高(P<0.05); miR-96-5p组各指标变化趋势与anti-miR-96-5p组相反; 裸鼠实验结果显示, 下调miR-96-5p可通过上调FBXW7表达水平而抑制TSCC实体瘤生长。敲低FBXW7可逆转下调miR-96-5p对TSCC细胞的抗增殖及促凋亡作用。结果表明, 下调miR-96-5p可通过上调FBXW7表达水平而抑制TSCC细胞增殖并促进其凋亡。




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