心肌梗死后周细胞向致病性成纤维细胞亚群转分化的谱系示踪研究
顾千瑜 陈海婷 谢峻*
(南京大学医学院, 南京 210093)
摘要 :
该文基于双转基因谱系示踪技术, 探究心肌梗死后周细胞能否转分化为致病性成纤维细胞F-Act亚群, 以揭示其在心室不良重塑中的作用。利用CRISPR/Cas9技术构建Cspg4CreERT2/+基因敲入小鼠, 然后将其与Rosa26loxP-tdTomato-loxP-GFP/+报告小鼠杂交, 建立他莫昔芬诱导的周细胞谱系示踪模型。通过永久性结扎左冠状动脉前降支构建小鼠心肌梗死模型, 分别于术前及术后7、14、28天获取心脏组织, 以CD248作为晚期活化成纤维细胞F-Act亚群特异性标志物, 采用多色免疫荧光染色及共聚焦显微镜观察周细胞衍生细胞的表型特征。基因型鉴定及免疫荧光验证结果显示, 该模型可实现心脏周细胞的高效、特异性谱系标记。心肌梗死后, 梗死边缘区GFP阳性细胞数量呈时间依赖性增加, 且大量GFP阳性细胞与CD248阳性细胞呈现明确共定位, 证实周细胞来源的细胞表达F-Act亚群特征性标志物。该研究表明, 在心肌梗死修复成熟期, 周细胞能够转分化为致病性成纤维细胞F-Act亚群, 该过程可能参与心室不良重塑与慢性纤维化进展, 为阐释心肌梗死后纤维化机制提供了新的细胞来源依据。
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