LncRNA XIST调控miR-7-5p/ADAM10轴对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响

该文研究长链非编码RNA-X染色体失活特异性转录因子(LncRNA XIST)调控miR-7 5p/解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)轴对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)增殖和凋亡的影响。采用 qRT-PCR分析正常皮肤组织、瘢痕疙瘩组织、正常人皮肤成纤维细胞-1(HFF-1)和HKF中LncRNA XIST、miR-7-5p及ADAM10 mRNA的表达水平。将HKF分为: Control组、si-NC组、si-LncRNA XIST组、si-LncRNA XIST+anti-NC组、si-LncRNA XIST+anti-miR-7-5p组、mimic-NC组、miR 7-5p mimic组、miR-7-5p mimic+pcDNA-NC组、miR-7-5p mimic+pcDNA-ADAM10组。采用qRT PCR测定各组细胞LncRNA XIST、miR-7-5p和ADAM10的表达情况; 双荧光素酶报告实验验证 LncRNA XIST与miR-7-5p以及miR-7-5p与ADAM10的关系; WST-1和平板克隆形成实验测定各组 细胞增殖情况; 流式细胞术测定各组细胞凋亡情况; Western blot测定各组细胞ADAM10、切割型 胱天蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)、Caspase-3蛋白表达水平。结果显示, 瘢痕疙瘩组织和HKF中Ln cRNA XIST、ADAM10 mRNA表达上调, miR-7-5p表达下调。双荧光素酶报告实验显示, LncRNA XIST和miR-7-5p以及miR-7-5p和ADAM10均有靶向作用关系。si-LncRNA XIST组的LncRNA XIST 水平、ADAM10 mRNA及蛋白水平、存活率、克隆形成数、Caspase-3表达水平较si-NC组或Con trol组降低, 而miR-7-5p水平、细胞凋亡率、cleaved-Caspase-3表达水平则升高(P<0.05); miR-7-5p mimic转染对HKF的作用与si-LncRNA XIST一致。与si-LncRNA XIST组或si-LncRNA XIST+anti NC组相比, si-LncRNA XIST+anti-miR-7-5p组ADAM10 mRNA及蛋白水平、存活率、克隆形成 数、Caspase-3表达水平升高, 而miR-7-5p水平、细胞凋亡率、cleaved-Caspase-3表达水平降低 (P<0.05)。与miR-7-5p mimic组或miR-7-5p mimic+pcDNA-NC相比, miR-7-5p mimic+pcDNA ADAM10组ADAM10 mRNA及蛋白水平、存活率、克隆形成数、Caspase-3表达水平升高, 细胞 凋亡率、cleaved-Caspase-3表达水平降低(P<0.05)。总之, 沉默LncRNA XIST可能通过调控miR 7-5p/ADAM10轴, 进而抑制HKF增殖, 促进其凋亡, 为瘢痕疙瘩的发病机制研究及靶向治疗提供新思路。

CSTR: 32200.14.cjcb.2025.10.0009