LncRNA SNHG25调节miR-6838-5p/FOXK1轴对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响
张双洋 姚俊 陈琛 邓继意 孙成亮*
该研究旨在探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因25(LncRNA SNHG25)调控微小 RNA-6838-5p/叉头框K1(miR-6838-5p/FOXK1)轴对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响。QRT-PCR检测 组织和细胞(T24、5637及EJ)中LncRNA SNHG25、miR-6838-5p和FOXK1 mRNA表达情况。将T24 细胞分为阴性对照(NC)组、si-NC组、LncRNA SNHG25敲低(si-SNHG25)组、si-SNHG25+miR 6838-5p抑制剂(si-SNHG25+in-miR-6838-5p)组和si-SNHG25+FOXK1过表达(si-SNHG25+oe FOXK1)组。采用QRT-PCR检测各组T24细胞转染效率; CCK-8法、BrdU法、集落形成实验、划 痕实验以及Transwell实验检测细胞增殖和迁移情况; Western blot检测T24细胞中p53、FOXK1、 Survivin、MMP9、Twist1和SOX9蛋白水平; 荧光素酶报告基因和RIP检测miR-6838-5p与LncRNA SNHG25以及FOXK1之间作用关系。体内实验检测LncRNA SNHG25对肿瘤生长的影响。结果显 示, 膀胱癌组织或细胞(T24、5637及EJ)中LncRNA SNHG25和FOXK1 mRNA水平上调, miR-6838 5p水平下调(P<0.05), 且T24细胞中三个因子表达趋势变化最明显。与si-NC组比较, si-SNHG25组 T24细胞中LncRNA SNHG25水平、细胞活力、BrdU阳性率、集落形成数量、伤口愈合率、迁移 细胞数量以及MMP9、Twist1、SOX9、FOXK1和Survivin水平均降低, miR-6838-5p、p53水平升高 (P<0.05)。与si-SNHG25组比较, si-SNHG25+in-miR-6838-5p组和si-SNHG25+oe-FOXK1组T24细 胞中细胞活力、BrdU阳性率、集落形成数量、伤口愈合率、迁移细胞数量以及MMP9、Twist1、 SOX9、FOXK1和Survivin水平均降低, p53水平升高(P<0.05)。miR-6838-5p与LncRNA SNHG25或 FOXK1之间存在相互作用关系, 且均在Ago2处富集(P<0.05)。敲低LncRNA SNHG25可减少体内肿 瘤组织体积、质量, 下调LncRNA SNHG25和FOXK1 mRNA表达, 上调miR-6838-5p表达(P<0.05)。 敲低LncRNA SNHG25可通过反向调节miR-6838-5p/FOXK1轴抑制膀胱癌细胞增殖和迁移。
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