巨噬细胞移动抑制因子通过Scr激酶信号通路调控心房成纤维细胞增殖与活化
王红丽1 李志强2 刘芬1 房彬彬1 范平3*
(1新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院, 省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室, 乌鲁木齐 830054; 2新疆医科大学实验动物中心, 乌鲁木齐 830011; 3新疆医科大学第一附属医院心功能科, 乌鲁木齐 830054)
摘要 :
该研究旨在探讨巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor, MIF) 通过酪氨酸(Src)激酶调节心房成纤维细胞增殖和活化的作用。首先, 采用血管紧张素II(angiotensin II, Ang II)构建小鼠心房颤动易感模型, 通过Western blot检测MIF表达和Src磷酸化水平, 并利用天 狼星红观察MIF基因敲除对心房纤维化的影响。其次, 分离成年小鼠心房组织原代细胞, 并采用免 疫荧光对所分离的细胞进行鉴定。使用重组MIF(rMIF, 20 ng/mL)及Src激酶抑制剂PP1分别处理细 胞24和48 h, CCK-8和EdU实验检测细胞增殖和活化; 免疫荧光和Western blot检测纤维相关蛋白的 表达情况。结果显示, 房颤小鼠中MIF表达及Src磷酸化水平均显著升高; MIF基因敲除可降低Src 磷酸化水平并减轻纤维化。体外实验结果表明, 分离所得的细胞呈现波形蛋白(vimentin)高表达与α 平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)低表达的特征, 鉴定为心房成纤维细胞。MIF可显著 促进心房成纤维细胞的增殖与活化, 而PP1能够有效抑制该效应。MIF通过激活Src激酶, 上调包括 COL3A1、COL1A1、MMP-2和TGF-β1在内的纤维化相关蛋白表达, 并诱导Smad2/3磷酸化; 而加 入PP1处理则可减弱上述现象。MIF通过Src-Smad2/3信号轴在心房成纤维细胞活化过程中发挥关 键作用。
中文版
英文版