基于SOCS3/TLR4/NF-κB通路探讨健脾清化汤对幽门螺杆菌诱导的胃黏膜上皮细胞损伤的影响
贺子雄1 孙美玉2 颜悦蓉3*
该研究基于细胞信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling 3, SOCS3)/Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)/核因子-κB(nuclear factor kappa-B, NF-κB)通路探讨健脾清化汤(Jianpi Qinghua Tang, CM)对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)诱导的胃黏膜上皮细胞损伤的影响。将正常培养的胃黏膜上皮细胞GES-1记为Control组、Hp诱导细胞损伤模型, 并根据不同处理方式将其分为Model组、CM组(120 μg/mL CM)、CM+sh-NC组(120 μg/mL CM+转染sh-NC)、CM+sh-SOCS3组(120 μg/mL CM+转染sh-SOCS3)。qRT-PCR及Western blot检测SOCS3转染效率。MTT和克隆形成实验检测各组细胞增殖情况; ELISA检测各组细胞中白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的表达情况; 流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况; Western blot检测各组细胞中Bcl-2、Bax、TLR4、NF-κB、SOCS3蛋白的表达情况。结果显示，与Control组相比, Model组细胞的存活率、克隆数、Bcl-2和SOCS3表达水平降低, 而细胞凋亡率以及Bax、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平升高(P<0.05); 与Model组相比, CM组细胞的存活率、克隆数、Bcl-2和SOCS3表达水平升高, 而细胞凋亡率以及Bax、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平降低(P<0.05); 与CM组或CM+sh-NC组相比, H-CM+sh-SOCS3组细胞的存活率、克隆数、Bcl-2和SOCS3表达水平降低, 而细胞凋亡率以及Bax、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平升高(P<0.05)。总之，CM可以抑制Hp诱导的GES-1细胞中炎症因子的分泌, 从而抑制细胞凋亡的发生, 进而减轻胃黏膜上皮细胞损伤, 其机制可能与激活SOCS3/TLR4/NF-κB通路有关。
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