miR-184靶向Hoxa5下调mTOR通路活性抑制脂肪细胞聚酯
范雨薇1,2 沈瑞莉1,2 徐珂3 施绮雯1 张瑾2,4* 毋文静2*
（1浙江工业大学, 杭州 310000; 2嘉兴大学生物与化学工程学院, 嘉兴 314001; 3嘉兴大学附属第二医院, 儿童医学中心, 嘉兴 314000; 4嘉兴爱博生物科技有限公司, 嘉兴 314050)
摘要 :
脂肪细胞的分化聚酯过程受到精细的调控, 其中miRNA所发挥的作用正在被逐步揭示。该文基于miRNA-seq筛选以及细胞功能验证, 旨在明确调控聚酯关键分子miR-184的作用及机制。首先, 以体外培养的猪肌内脂肪(intramuscular fat, IM)细胞和皮下脂肪(subcutaneous fat, SC)细胞为材料, miRNA-seq分析发现相比于聚酯能力较强的SC细胞, miR-184在聚酯能力较弱的猪IM细胞中表达水平更高; 进一步分析小鼠前脂肪细胞系3T3-L1, 发现miR-184的表达水平在细胞分化过程中持续降低, 推断其为脂肪细胞聚酯的负调控因子; 然后, 利用miR-184-mimics转染3T3-L1细胞, 发现胞内甘油三酯的积累减少, 脂合成标志基因脂肪酸合成酶(FAS)和脂肪酸结合蛋白4(aP2)的表达水平降低, 脂分解关键基因脂肪组织甘油三酯酯酶(ATGL)和脂蛋白酯酶(LPL)的表达水平升高; 随后, 用miR-184-inhibitor验证了上述miR-184的作用。最后利用双荧光素酶报告分析等方法确定miR-184可直接靶向Hoxa5基因, 抑制mTOR信号通路的活性。综上, miR-184可能通过靶向Hoxa5下调mTOR信号通路活性, 进而抑制脂肪细胞的聚酯。
中文版
英文版