miR-182-5p靶向XBP1对氧糖剥夺/复氧诱导的神经细胞损伤的影响
孟智敏1* 刘品2 倪秀娟1 王莉1 乔丽娜1
该文探究miR-182-5p靶向内质网应激相关蛋白剪接型X盒结合蛋白1(X-box bindingprotein 1, XBP1)对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucosedeprivation/reoxygenation, OGD/R)诱导的神经细胞损伤的影响。选择大鼠神经细胞(PC-12)对研究对象, 随机将其分为: Control组、OGD/R组、miR-NC组(OGD/R+转染miR-NC)、miR-182-5p mimics组(OGD/R+转染miR-182-5p mimics)、miR-182-5p mimics+pcDNA-NC组(OGD/R+转染miR-182-5p mimics+pcDNANC)、miR-182-5p mimics+pcDNA-XBP1组(OGD/R+转染miR-182-5p mimics+pcDNA-XBP1)。除Control组常规培养外, 其余各组均进行OGD/R诱导。qRT-PCR法检测细胞miR-182-5p、XBP1 mRNA表达情况; CCK8检测细胞增殖情况; 流式细胞仪检测细胞凋亡率; ELISA法检测细胞SOD、MDA、IL-6、TNF-α水平; Western blot检测细胞中PCNA、caspase-9、Bax、XBP1蛋白的表达情况; 双荧光素酶实验检测miR-182-5p与XBP1互作情况。结果显示, 与Control组相比, OGD/R组miR-182-5p表达、存活率、克隆数、SOD水平、PCNA蛋白表达水平降低(P<0.05), 凋亡率、MDA、IL-6、TNF-α水平以及Bax、caspase-9、XBP1蛋白表达水平升高(P<0.05); 与OGD/R组、miR-NC组相比, miR-182-5p mimics组miR-182-5p表达、存活率、克隆数、SOD水平及PCNA蛋白表达水平升高(P<0.05), 凋亡率、MDA、IL-6、TNF-α水平以及Bax、caspase-9、XBP1蛋白表达水平降低(P<0.05); 与miR-182-5p mimics组、miR-182-5pmimics+pcDNA-NC组相比, miR-182-5p mimics+pcDNA-XBP1组存活率、克隆数、SOD水平及PCNA蛋白表达水平降低(P<0.05), 凋亡率、MDA、IL-6、TNF-α水平以及Bax、caspase-9、XBP1蛋白表达水平升高(P<0.05); 与miR-NC+XBP1-WT组相比, miR-182-5p mimics+XBP1-WT组双荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。总之, miR-182-5p可能通过靶向抑制XBP1表达, 进而抑制OGD/R诱导的神经细胞损伤。