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木犀草素调控Nrf2/HO-1通路对LPS诱导的软骨细胞损伤的影响


潘永利1 热合木江·木合塔尔1 塔依尔·帕拉提1 刘丽琼2*

(1巴音郭楞蒙古自治州人民医院关节外科, 新疆 841000; 2宝石花库尔勒医院中医康复科, 新疆 841000)
摘要 :

该研究探究木犀草素(Luteolin)调控核红细胞相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路对脂多糖(LPS)诱导的软骨细胞损伤的影响。将人软骨细胞系C28/I2细胞分为空白组、LPS组(10 μg/mL), Luteolin低、中和高剂量(25、50和100 μmol/L)组和Luteolin(100 μmol/L)+Nrf2抑制剂(5 μmol/L ML385)组, 除空白组外, 其余组细胞均使用LPS诱导细胞损伤。采用乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞毒性; 细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力; TUNEL染色检测细胞凋亡情况; 酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和白细胞介素-6(IL-6)浓度; 比色法检测氧化应激因子总超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平; 探针DCFH-DA检测活性氧(ROS)生成水平; Western blot检测细胞中Nrf2、HO-1、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS-5)蛋白表达情况。与空白组相比, LPS组细胞LDH含量、TUNEL阳性率、TNF-α浓度、iNOS浓度、IL-6浓度、ROS水平、MMP-13和ADAMTS-5蛋白表达水平均升高(P<0.05), D450值、CAT和T-SOD活性以及Nrf2和HO-1蛋白表达水平均降低(P<0.05); 与LPS组相比, 25、50和100 μmol/L Luteolin组细胞LDH、TUNEL阳性率、TNF-α浓度、iNOS浓度、IL-6浓度、ROS水平、MMP-13和ADAMTS-5蛋白表达水平降低(P<0.05),D450值、CAT和T-SOD活性以及Nrf2和HO-1蛋白表达水平升高(P<0.05); 与100 μmol/L Luteolin组相比, Luteolin+ML385组细胞LDH含量、TUNEL阳性率、TNF-α浓度、iNOS浓度、IL-6浓度、ROS水平、MMP-13和ADAMTS-5蛋白表达水平升高(P<0.05), D450值、CAT和T-SOD活性以及Nrf2和HO-1蛋白表达水平降低(P<0.05)。Luteolin通过激活Nrf2/HO-1通路可以减弱LPS诱导的软骨细胞损伤作用。


CSTR: 32200.14.cjcb.2025.05.0010