白藜芦醇预处理的脂肪间充质干细胞通过调节自噬保护CCl4诱导的肝细胞损伤
刘双娟# 孙莹莹# 候乐瑶 马溪媛 吕琼霞 陈晓光 刘玉梅 张自强*
该文旨在探讨白藜芦醇(resveratrol, Res)预处理脂肪间充质干细胞(adipose mesenchymal stem cells, ADSCs)对四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl4)诱导的肝细胞损伤的治疗效果及作用机制。从小鼠腹股沟分离提取ADSCs, 培养至第3代, 成脂、成骨分化能力检测。将不同浓度Res预处理第3代的ADSCs与CCl4 损伤的BRL-3A细胞共培养, 采用CCK-8法检测肝细胞活力, 以及试剂盒检测BRL-3A细胞AST、ALT含量变化来筛选Res最适浓度; 之后将BRL-3A细胞分为对照组、CCl4模型组、ADSCs治疗组、Res预处理ADSCs治疗组、Res预处理ADSCs+3-MA治疗组。试剂盒检测各组AST、ALT、ALB以及ALP含量变化。Western blot检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3II、p62及PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达。结果表明, 筛选出Res的最适浓度是20 μmol/L, 与模型组相比, ADSCs和Res预处理的ADSCs治疗后改善了受损BRL-3A细胞AST、ALT、ALP和ALB的水平, Res预处理组治疗效果更为明显。此外, WB结果显示, 与模型组相比, Res预处理的ADSCs能够上调BRL-3A细胞自噬相关蛋白Beclin-1、LC3II的表达, 下调p62的表达, 同时还可以抑制AKT/PI3K/mTOR通路相关蛋白表达, 而当加入自噬抑制剂3-MA后, Res预处理的ADSCs对损伤肝细胞的治疗作用明显被抑制。这些结果表明, Res预处理的ADSCs可通过促进自噬修复肝损伤, 自噬的增加可能与抑制PI3K/AKT/mTOR通路有关。
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