中性粒细胞胞外诱捕网通过重塑细胞外基质促进肝癌细胞增殖并损伤肝细胞功能
钟泓灵1# 王金丽2# 肖思嘉2 沈侃1 钱辰1 王文喜2 詹淑玉1 程树群3 郑永霞1*
肝细胞癌(HCC)是一种常见的恶性肿瘤, 慢性炎症是其发生发展的重要驱动因素。中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)作为炎症反应的重要组成部分, 通过影响肿瘤微环境发挥促进肿瘤增殖、迁移、免疫逃逸等重要作用。该研究旨在深入探讨NETs在调控HCC增殖和代谢重编程中的作用。在体外实验中, 建立NETs与肝癌细胞系Hep3B体外共培养模型, 通过CCK-8实验、细胞周期检测、软琼脂克隆形成等实验, 考察NETs对肝癌细胞增殖的影响。在体内实验中, 建立小鼠Hep1-6细胞皮下移植瘤模型并使用脂多糖诱导小鼠体内NETs形成。通过测量小鼠肿瘤大小, 检测肝脏病理变化等指标, 考察NETs对肿瘤生长的作用。另外, 通过检测肝癌组织和肝癌细胞中的糖原含量以及HCC中糖酵解相关基因的表达情况, 从而探究NETs对肝癌细胞代谢以及肝细胞功能的影响。最后,为了探讨NETs影响HCC增殖的机制, 通过免疫荧光的方法检测了细胞外基质纤连蛋白(Fn)的表达水平, 并通过Western blot检测了Fn所介导的整合素通路的活性。体外实验表明, NETs与Hep3B细胞共培养可以显著促进Hep3B细胞增殖。体内实验进一步证实, NETs可以诱导C57BL/6小鼠炎性细胞浸润肝脏并加速Hep3B细胞移植瘤的生长。代谢分析显示, NETs降低了肝癌细胞内的糖原储备, 增强了糖酵解活性, 同时Hep3B细胞上清中的ALT水平升高提示Hep3B细胞功能受损。机制研究表明:NETs通过上调细胞外基质中Fn的表达重塑肿瘤微环境, 从而为肝癌细胞的生长提供有利条件。因此,该研究揭示NETs通过诱导ECM重塑促进HCC增殖, 增强糖酵解, 并损伤肝细胞功能。
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