特异性人端粒酶催化亚单位基因小干扰 RNA对HeLa细胞生长的抑制作用

摘要 : 通过设计并化学合成人端粒酶催化亚单位(hTERT)特异性siRNA，观察其对hTERT 表达水平及肿瘤细胞生长的影响。将hTERT-siRNA以脂质体法转染入HeLa细胞，应用RT-PCR、实时定量TRAP、Western 印迹、软琼脂克隆形成实验、荷瘤裸鼠肿瘤内注射等方法检测细胞内 hTERT mRNA、蛋白质表达水平及对肿瘤细胞生长的影响。RT-PCR、实时定量TRAP和Western 印迹的结果显示hTERT-siRNA明显降低了HeLa细胞内hTERT的 mRNA及蛋白质表达水平并伴随有端粒酶活性的下降。克隆形成实验表明hTERT-siRNA组的体外肿瘤形成能力受到抑制。荷瘤裸鼠肿瘤内注射hTERT-siRNA使肿瘤平均体积显著小于对照组。TUNEL凋亡检测表明hTERT- siRNA转染组的凋亡率明显高于对照组。研究表明hTERT特异性siRNA可以明显抑制HeLa细胞内hTERT的表达水平，对其生长有明显抑制作用，是一种有前途的肿瘤治疗新方法。