OX-M-AdmCLB1重组腺病毒制备及其诱导的体内抗肿瘤效应

张　伶　魏于全¹　蒋　磊　李继承^*

浙江大学细胞生物学研究所，杭州 310031；¹四川大学华西医院肿瘤生物治疗国家重点实验室，成都 610041

摘要 : 构建小鼠细胞周期蛋白B1(mcyclin B1)重组腺病毒(AdmCLB1)，将氧化型甘露聚糖(OX-M)与AdmCLB1偶联，制备OX-M-AdmCLB1，研究OX-M-AdmCLB1诱导的抗肿瘤效应。利用AdEasy系统构建携带靶基因小鼠细胞周期蛋白B1的复制缺陷型重组腺病毒AdmCLB1，抽提 AdmCLB1基因组DNA，进行PCR扩增。重组病毒经扩增、纯化后与OX-M混合，制备OX-M- AdmCLB1；OX-M-AdmCLB1体外感染小鼠树突状细胞(DC)，RT-PCR扩增分析靶基因表达；OX- M-AdmCLB1处理BALB/C小鼠，处理后再荷瘤，观察小鼠肿瘤生长及生存情况。重组病毒AdmCLB1 终滴度为2.1?011 pfu/ml；DC内靶基因的表达量在OX-M-AdmCLB1组较AdmCLB1组高；体内研究提示OX-M-AdmCLB1可明显抑制CT26肿瘤增殖(抑瘤率44%)、延长动物生存期 (P<0.01)。实验制备的新型重组腺病毒OX-M-AdmCLB1体内能够诱导明显的抗肿瘤效应，估计此效应的产生与 DC特异识别 OX-M-AdmCLB1，进而激活机体抗肿瘤免疫有关。