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小檗碱通过PI3K/AKT信号通路调控人牙周膜干细胞的增殖和成骨分化


刘岚 魏松 张丞 马永平*

(保定市第二医院口腔科, 保定 071051)
摘要 :

该文旨在探讨小檗碱(berberine)对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)增殖和成骨分化的影响及潜在的机制。体外培养hPDLSCs, 将其分为空白对照(Con)组、PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002(LY)组、小檗碱(Ber)组和小檗碱+PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002(Ber+LY)组, 采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测hPDLSCs的增殖活力, 流式细胞仪检测细胞周期分布, 酶联免疫检测仪检测碱性磷酸酶(ALP)活性, 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、骨钙蛋白(OCN)、骨膜蛋白(POSTN)和骨桥蛋白(OPN)的表达情况, 蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PCNA、Cyclin D1、OCN、POSTN、OPN和PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达情况。与Con组相比, Ber组hPDLSCs增殖活力, ALP的活性, S期和G2/M期细胞比例, PCNA、Cyclin D1、OCN、POSTN、OPN、p-PI3K和p-AKT的表达水平均显著升高, G0/G1期细胞比例显著降低(P<0.05), LY组上述指标呈相反变化(P<0.05); 与Ber组相比, Ber+LY组hPDLSCs增殖活力, ALP的活性, S期和G2/M期细胞比例, PCNA、Cyclin D1、OCN、POSTN、OPN、p-PI3K和p-AKT的表达水平均显著降低, G0/G1期细胞比例显著升高(P<0.05)。小檗碱可通过激活PI3K/AKT信号通路促进hPDLSCs增殖, 并诱导hPDLSCs成骨分化。