肺炎支原体MsrB经MAPK/NF-κB通路抑制脂质相关膜蛋白诱生促炎细胞因子

孟雁¹ 李婷婷¹ 何桂婷¹ 王智敏² 肖智琴² 田巍^3* 朱翠明^1*

(¹南华大学衡阳医学院病原生物学研究所, 特殊病原体防控湖南省重点实验室, 衡阳 421001; ² 南华大学船山学院医学检验技术专业, 衡阳 421001; ³ 南华大学衡阳医学院, 附属南华医院输血科, 衡阳 421001)

摘要 :

蛋氨酸亚砜还原酶B(methionine sulfoxide reductase, MsrB)是一种重要的氧化还原蛋白。该文探究了肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae, Mp) MsrB对Mp脂质相关膜蛋白(lipidassociated membrane proteins, LAMPs)刺激的人髓系白血病单核细胞(THP-1细胞)分泌促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的调节及相关信号通路, 以进一步了解Mp的免疫逃避机制。论文构建了pET28a(+)-msrB重组质粒, 诱导表达、鉴定、纯化重组蛋白(rMsrB)并制备了多克隆抗体; Western blot检测MsrB、TLR1、TLR2、TLR6和MyD88蛋白表达水平及NF-κB p65、 P38、ERK和JNK的总蛋白和磷酸化蛋白水平; 间接免疫荧光分析NF-κB核转位; ELISA测定TNF-α 和IL-1β分泌水平。结果显示MsrB可表达于Mp胞质和胞膜。rMsrB预处理可抑制LAMPs刺激的 THP-1细胞合成TNF-α和IL-1β。Mp rMsrB可抑制LAMPs刺激的THP-1细胞表达TLR2、MyD88、 p-ERK、p-JNK、p-p38和p-p65, 并抑制NF-κB的核转位。抑制NF-κB、P38、ERK和JNK表达后, rMsrB可进一步抑制LAMPs刺激的THP-1细胞产生TNF-α和IL-1β。综上, Mp MsrB经MAPK/NF-κB 信号通路抑制LAMPs刺激的THP-1细胞分泌TNF-α和IL-1β。