HucMSC-Ex通过调控TRPC6介导Ca²⁺内流并促进糖尿病创面愈合

该文旨在探讨糖尿病创面中瞬时受体电位阳离子通道亚家族C成员6(transient potential canonical 6, TRPC6)的变化和功能以及人脐带间充质干细胞源外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cell derived exosome, hucMSC-Ex)对TRPC6的调控作用。组织免疫荧光检测临床糖尿病足部 溃疡(diabetic foot ulcer, DFU)患者创面与创缘组织中TRPC6的表达情况, qRT-PCR和Western blot分别 检测晚期糖基化终末产物修饰的牛血清白蛋白(bovine serum albumin modified with advanced glycosylation end products, AGE-BSA)刺激后大鼠真皮成纤维细胞(dermal fibroblasts, DFs)中TRPC6的mRNA 和蛋白表达情况; 通过用小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)和过表达质粒转染DFs考察TRPC6 对DFs Ca²⁺内流、增殖和胶原蛋白分泌等生物学功能的影响。采用细胞免疫荧光检测hucMSC-Ex对 DFs分泌胶原蛋白能力的影响, 构建SD大鼠DFU模型, 加入hucMSC-Ex干预, HE染色观察皮肤结构, 评 价hucMSC-Ex对DFU的治疗作用。进一步通过qRT-PCR、Western blot、细胞免疫荧光、免疫组化等 验证hucMSC-Ex对TRPC6的调控作用。结果显示, 糖尿病创面中TRPC6通道蛋白水平显著降低, 敲减 TRPC6减少了DFs Ca²⁺内流, 抑制了其生物学功能; 过表达TRPC6增加了DFs Ca²⁺内流, 促进了其生物 学功能。总之, hucMSC-Ex可以通过上调TRPC6表达介导Ca²⁺内流并促进糖尿病创面愈合。