蛋白磷酸酯酶抑制剂冈田酸对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系tau蛋白磷酸化水平的影响

摘要 : 观察蛋白磷酸酯酶-1和蛋白磷酸酯酶-2A的抑制剂冈田酸(okadaic acid， OA) 对人神经母细胞瘤系SK-N-SH细胞tau蛋白磷酸化水平的变化，确定tau蛋白过度磷酸化细胞模型的合适剂量和时间。用不同剂量OA与SK-N-SH细胞共温育不同时间，用显微镜观察细胞形态变化，用Western印迹法检测磷酸化tau蛋白和非磷酸化tau蛋白在Ser202位点和Ser404位点磷酸化水平的变化。10~160 nmol/L OA与SK-N-SH神经细胞温育3~24 h， 可引起细胞形态损伤呈剂量依赖性和时间依赖性的变化，起效剂量和时间为10 nmol/L和3 h。10 nmol/L OA与SK-N-SH细胞温育6~24 h，磷酸化tau蛋白Ser199/Ser202位点和Ser404位点的表达明显增高，非磷酸化tau蛋白Ser202 位点和Ser404位点的表达明显降低，总tau蛋白含量无明显变化。OA可以作为很好的研究tau蛋白过度磷酸化的工具药，10 nmol/L OA与SK-N-SH神经细胞共温育6 h可以作为制备细胞模型的适宜条件。