anti-PTK7/MET双特异性抗体偶联药物的构建及其抗肿瘤活性研究

束瑞雪^1,2,3 尚诚彰² 金美琴^1,2,3 沈月雷^2,3*

(¹安徽中医药大学药学院, 合肥 230000; ² 百奥赛图(北京)医药科技股份有限公司, 北京 100000; ³长三角药物高等研究院, 南通 226000)

摘要 :

该研究旨在构建靶向酪氨酸激酶蛋白7(protein tyrosine kinase 7, PTK7)及细胞间质–上皮转换因子(cellular-mesenchymal epithelial transition factor, c-MET/MET)的双特异性抗体偶联药物 (bispecific antibody-drug conjugate, BsADC), 将其命名为P91M32-ADC, 并对其体内外药效进行初步评价。采用流式荧光分选技术(fluorescence activated cell sorting, FACS)和Incucyte检测P91M32在肿瘤细胞系中的结合能力及内吞作用; 采用半胱氨酸偶联技术将靶向PTK7和MET的双特异性抗体分子与微管蛋白抑制剂甲基澳瑞他汀E(monomethyl auristatin E, MMAE)偶联成药物抗体比(drug to antibody ration, DAR)为4的小分子药物; 采用Incucyte比较P91M32-ADC与靶向PTK7和MET的ADC 阳性药(分别为ABBV-647 analog-ADC和ABBV-399 analog-ADC)的体外杀伤能力; 最后在体内药效模型中探究P91M32-ADC的体内抑瘤活性。研究发现P91M32-ADC具有较强的肿瘤细胞系结合活性且表现出较ABBV-647 analog-ADC和ABBV-399 analog-ADC更强的内吞和体外杀伤活性, 在所测试的体内药效模型中均体现强烈的抑制肿瘤生长活性。该研究成功构建靶向PTK7/MET的双特异性ADC药物P91M32-ADC, 且结果显示特异性靶向双抗原的P91M32-ADC具有提升PTK7单靶点 ADC药效的潜力。