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淫羊藿苷对博来霉素诱导的GC-1细胞DNA损伤的保护作用


赵雪怡 赵海霞 杨圆 杨思琪 袁丁 张长城*

(三峡大学医学院, 宜昌 443002)
摘要 :

该文旨在探究淫羊藿苷(icariin, ICA)对博来霉素(bleomycin, BLM)诱导的小鼠GC-1精原细胞DNA损伤的保护作用及其分子机制。将GC-1细胞分为正常对照组、BLM处理组(10 μg/mL)、BLM+不同浓度(0.5、1、2和4 μmol/L) ICA组。用不同浓度ICA预保护GC-1细胞12 h后加入BLM继续处理6 h, 收集细胞, Western blot法检测DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、DNA损伤修复相关通路蛋白(p-ATM、p-Chk1、p-P53和P21)、碱基切除修复(base excision repair, BER)相关通路蛋白(OGG1、APE1和XRCC1)的表达水平; 免疫荧光技术检测γ-H2AX、8-OHdG表达与定位。结果表明, 与正常对照组相比,BLM处理组中γ-H2AX、p-ATM、p-Chk1、p-P53、P21、OGG1、APE1和XRCC1的蛋白表达水平均显著上升, 而ICA可浓度依赖性地下调BLM诱导的γ-H2AX、p-ATM、p-Chk1、p-P53、P21、OGG1、APE1和XRCC1蛋白表达水平。免疫荧光结果显示, 与正常对照组相比, BLM处理组中γ-H2AX阳性细胞数量和8-OHdG表达量呈上升的趋势, 而不同浓度ICA均可下调上述BLM诱导的γ-H2AX和8-OHdG表达水平。综上所述, ICA能够改善BLM诱导的GC-1细胞DNA损伤, 并下调ATM/Chk1通路和BER信号通路活性。