circGFRA1靶向miR-642a-5p调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

李生贵¹ 潘正启²* 叶铄¹ 乔永杰¹ 周胜虎¹

(¹中国人民解放军联勤保障部队第940医院关节外科, 兰州 730050; ²武汉大学中南医院骨科, 武汉 430071)

摘要 :

该研究探讨了circGFRA1对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(SFs)增殖、迁移和侵袭的影响及其可能机制。收集了39例RA患者的滑膜组织和39例膝关节创伤且无其他关节异常病史患者的滑膜组织(正常滑膜组织), qRT-PCR法检测组织中circGFRA1和miR-642a-5p表达情况。体

外分离培养RASFs, 分别转染circGFRA1小干扰RNA、miR-642a-5p模拟物, 或共转染circGFRA1小干扰RNA与miR-642a-5p抑制剂后, CCK-8法、划痕实验、Transwell小室分别检测细胞增殖、迁移和侵袭; 蛋白质印迹法检测细胞中Ki67、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达; 双荧光素酶报告基因实验验证circGFRA1和miR-642a-5p的调控关系。结果显示, RA患者滑膜组织中circGFRA1表达水平较正常滑膜组织显著升高(P<0.05), miR-642a-5p较正常滑膜组织显著降低(P<0.05); 下调circ-GFRA1或上调miR-642a-5p后, RASFs细胞D值、划痕愈合率、侵袭数及细胞中Ki-67、N-cadherin蛋白表达均呈显著下降趋势(P<0.05), E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05); circGFRA1在RASFs中靶向负调控miR-642a-5p; 下调miR-642a-5p逆转了下调circGFRA1对RASFs增殖、迁移和侵袭的影响。综上, circGFRA1可能通过靶向下调miR-642a-5p促进类风湿性关节炎细胞增殖、迁移和侵袭。