过表达SNHG5对高糖诱导HK-2细胞凋亡及氧化应激的影响

该文探讨小核仁RNA宿主基因5(small nucleolar RNA host gene 5, SNHG5)对高糖 (high glucose, HG)诱导的HK-2凋亡、氧化应激的影响及分子机制。采用30 mmol/L葡萄糖处理 HK-2细胞48 h, 将pcDNA、pcDNA-SNHG5、anti-miR-阴性对照(negative control, NC)、微小RNA196a(microRNA-196a, miRNA/miR-196a) inhibitor、pcDNA-SNHG5分别与miR-NC、miR-196a mimic 共转染至HK-2细胞中, 用30 mmol/L葡萄糖处理48 h。实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, RT-qPCR)检测SNHG5和miR-196a的表达水平; 细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8, CCK-8)检测细 胞增殖; 流式细胞术检测细胞凋亡情况; Western blot法检测蛋白表达水平; 丙二醛(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)试剂盒分别检测MDA含量及SOD、GSH-Px活性; 双荧光素酶报告实验检测SNHG5和miR196a的靶向关系。该研究得出, 高糖诱导的HK-2细胞活性以及细胞中的SNHG5表达水平、B细胞 淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2, Bcl-2)表达水平均降低, miR-196a表达水平、凋亡率、 活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase 3, Cleavedcaspase3)表达水平、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)表达水平、MDA含量均升高, SOD、GSH-Px活性降低(P<0.05)。过表达SNHG5或抑制miR-196a表达后, 高糖诱导的HK-2的细胞 活性显著上升且细胞死亡率降低, Bcl-2表达水平显著上升, Bax、Cleaved-caspase3与MDA含量明显 降低, SOD、GSH-Px活性升高(P<0.05)。SNHG5靶向调控miR-196a, miR-196a过表达可逆转SNHG5 对高糖诱导的HK-2细胞活性、凋亡和氧化应激的影响。总之, 过表达SNHG5可能通过下调miR196a抑制高糖诱导的HK-2凋亡及氧化应激。