lncRNA SOX2-OT通过调控miR-519e-5p影响乳腺癌细胞增殖及放射敏感性的分子机制研究

该研究探讨了lncRNA SOX2-OT对乳腺癌细胞增殖和放射敏感性的影响及可能机制。 采用qRT-PCR法检测了正常乳腺上皮细胞MCF-10A及乳腺癌细胞系(MCF-7、T47D和Bcap-37)中 lncRNA SOX2-OT和miR-519e-5p表达。乳腺癌T47D细胞中lncRNA SOX2-OT和miR-519e-5p表达 较MCF-10A细胞差异最显著(P<0.05), 选择乳腺癌T47D细胞为研究对象。采用核质分离及RNA 荧光原位杂交分析lncRNA SOX2-OT在T47D细胞内的定位。分别向T47D细胞转染lncRNA SOX2- OT小干扰RNA、miR-519e-5p模拟物、过表达RNA SOX2-OT、共转染lncRNA SOX2-OT小干扰 RNA与miR-519e-5p抑制剂、共转染过表达RNA SOX2-OT与miR-519e-5p模拟物, 即得si-lncRNA SOX2-OT组、si-NC组、miR-519e-5p组、miR-NC组、si-lncRNA SOX2-OT+anti-miR-519e-5p组、 si-lncRNA SOX2-OT+anti-miR-NC组、RNA SOX2-OT+miR-519e-5p mimics组、si-lncRNA SOX2- OT+miR-NC组。采用CCK-8法观察细胞增殖活性, 克隆形成实验计算细胞存活分数, 并用单击多 靶数学模型计算细胞增敏比, 蛋白质印迹法检测细胞中CyclinD1和γ-H2AX蛋白表达。双荧光素酶 报告基因实验验证lncRNA SOX2-OT和miR-519e-5p的调控关系。结果显示, lncRNA SOX2-OT主 要定位于T47D的细胞质。敲减lncRNA SOX2-OT或上调miR-519e-5p后, T47D细胞增殖活性和存活 分数均降低(P<0.05), 增敏比分别为1.195、1.343, 细胞中CyclinD1蛋白表达降低(P<0.05), γ-H2AX 蛋白表达升高(P<0.05)。lncRNA SOX2-OT在T47D细胞中靶向负调控miR-519e-5p。下调或上调 miR-519e-5p可分别逆转敲减或上调lncRNA SOX2-OT对T47D细胞增殖和放射敏感性的影响。总之, lncRNA SOX2-OT可能通过靶向负调控miR-519e-5p促进乳腺癌细胞增殖并降低乳腺细胞对放射的敏感性。