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氯化钴诱导低氧与气体低氧对大鼠原代肺动脉平滑肌细胞增殖作用的比较研究


胡月迪1 朱洁1,2,3* 张璐2 王小乐2 童佳兵2,3,4 成伟业1 李泽庚2,3

(1安徽中医药大学中西医结合学院, 合肥 230012; 2安徽省中医药科学院中医呼吸病防治研究所, 合肥 230031; 3新安医学教育部重点实验室, 合肥 230012; 4安徽中医药大学第一附属医院, 合肥 230031)
摘要 :

该研究比较了氯化钴(cobalt chloride, CoCl2)诱导低氧与气体低氧对大鼠原代肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells, PASMCs)增殖及氧化应激的影响。采用不同剂量(25 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L、200 μmol/L、400 μmol/L) CoCl2诱导细胞或将细胞置于低氧培养箱中, 通过MTT、CCK-8和EdU检测比较CoCl2诱导低氧与气体低氧对大鼠原代PASMCs增殖的影响, 并通过Western blot、流式细胞术比较CoCl2诱导低氧与气体低氧对低氧敏感蛋白低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)表达量和细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量的影响。结果显示, CoCl2或气体低氧刺激细胞24 h均可增加PASMCs增殖活力、HIF-1α蛋白表达量和ROS含量。气体低氧下PASMCs增殖活力显著高于低(25 μmol/L)、中(200 μmol/L)、高(400 μmol/L)剂量CoCl2组, 且HIF-1α蛋白表达、ROS含量显著上调。中剂量CoCl2诱导的PASMCs增殖活力、ROS含量显著高于低、高剂量组; 随着CoCl2剂量增加, HIF-1α蛋白表达量增加。结果表明, CoCl2能一定程度诱导低氧, 引起细胞内氧化应激, 促进大鼠原代PASMCs增殖, 并呈一定的剂量、时间依赖性, 但其增殖效应不及气体低氧。