鸡卵清提取液诱导293T细胞高表达tRFs&tiRNAs分子及细胞功能验证

tRNA源性片段(tRNA-derived fragments, tRFs)和tRNA源性应激诱导RNAs(tRNAderived stress-induced RNAs, tiRNAs)是tRNAs的衍生片段, 属于短的非编码RNA家族, 通过转 录、 翻译、信号通路等途径参与复杂的生物反应。该文旨在验证鸡卵清提取液诱导293T细胞后升 高的3个tRFs&tiRNAs分子的细胞功能。将293T细胞加于6孔板中, 3个孔加普通培养基, 3个孔加 50%鸡卵清提取液的培养基, 共培养3天。对照组3个样本和诱导组3个样本进行高通量测序检测 tRFs&tiRNAs分子在两组中的差异表达。经检测验证诱导后的细胞有3个tRFs&tiRNAs分子稳定升 高。这3个分子上调表达有统计学意义。合成这3个分子转染293T细胞, WB检测多能因子OCT4和 NANOG的变化, 定量PCR检测多能基因OCT4和NANOG的变化和端粒的相对表达量, 流式检测多 能因子OCT4和NANOG的变化。同时检测这3个分子转染293T细胞后细胞增殖、细胞凋亡和细胞 周期的变化情况。结果表明, 3个分子转染293T细胞后, WB检测到多能因子OCT4和NANOG表达 对比未转染细胞明显升高, 定量PCR检测多能基因OCT4和NANOG相对表达量对比未转染细胞明 显升高, 端粒对比未转染细胞明显增长。流式检测到多能因子OCT4和NANOG阳性表达细胞对比 未转染细胞明显增多。这3个分子转染293T细胞后细胞活性增强, 细胞凋亡减少, 细胞周期也发生 了一定的改变。该研究证明了这3个分子过表达可促进293T细胞多能因子OCT4和NANOG表达升 高, 促进端粒增长, 使细胞年轻化。同时这3个分子过表达可使细胞活性增强, 细胞凋亡减少。