分化的骨骼肌细胞的不同固定和化学染色方法比较

该文比较了几种不同固定和化学染色方法对分化的骨骼肌细胞的效果及优缺点, 并探讨了用化学染色法进行骨骼肌细胞形态学分析的可行性。骨骼肌前体细胞系C2C12经肌分化诱导3天后分别使用4%多聚甲醛(paraformaldehyde, PFA)、甲醇(methanol)、卡诺氏(Carnoy)固定液固定5 min、10 min和15 min, 以确定最适固定方法; 然后分别用改良苯酚品红(modified phenol fuchsin)、吉姆萨(Giemsa)、苏木精–伊红(hematoxylin-eosin, HE)三种不同的染液进行染色。结果表明, 4% PFA固定5 min或10 min较其他方法更好地保持了肌管的形态; 对于分化的骨骼肌细胞包括形成肌管的细胞和未形成肌管的细胞, HE染色优于其他几种染色方法, 但以上几种方法均不如免疫荧光染色方法。