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microRNA-21靶向PDCD4/PTEN对大鼠ADSCs凋亡的抑制作用


张梦雨 刘玉梅 石珂 孙莹莹 孟冰冰 张自强*

(河南科技大学动物细胞生物学实验室, 洛阳 471000)
摘要 :

该研究探究miR-21对大鼠ADSCs凋亡的影响, 为提高ADSCs移植存活率提供依据。该研究建立大鼠ADSCs体外凋亡模型, 采用qRT-PCR检测miR-21的表达。在ADSCs中采用Lipofectamine 2000转染miR-21 mimics, qRT-PCR检测miR-21 mimics转染效率。CCK-8、Hoechst 33258检测大鼠ADSCs过表达miR-21对细胞存活率的影响; Western blot检测大鼠ADSCs过表达miR-21后凋亡相关蛋白表达量。结果显示H2O2诱导细胞凋亡后, miR-21在ADSCs中的表达明显下调。大鼠ADSCs转染miR-21 mimics后, ADSCs中miR-21的表达量较对照组显著提高了7.4倍。与miR-21 scramble组相比, ADSCs过表达miR-21后, ADSCs存活率显著升高, 促凋亡蛋白Caspase-3和Bax的表达量显著降低, 而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平明显升高。与对照组相比, miR-21过表达后, PDCD4PTEN mRNA无显著变化, 但PDCD4和PTEN蛋白表达明显下调。利用PDCD4 siRNA和Phen阻断PDCD4和PTEN的表达后, Caspase-3、Bax的表达水平显著降低, Bcl-2的表达水平显著升高。该研究得出miR-21通过靶向PDCD4/PTEN增强大鼠ADSCs对凋亡的抑制作用。