CircRNA ANKRD36靶向miR-127-5p调控脓毒症血管内皮细胞凋亡和氧化应激的分子机制研究

为了探讨CircRNA ANKRD36对脓毒症血管内皮细胞凋亡和氧化应激的影响及可能机制, 该研究将CircRNA ANKRD36小干扰RNA、miR-127-5p模拟物或CircRNA ANKRD36小干扰RNA和miR-127-5p抑制剂转染至人脐静脉血管内皮细胞中, 然后用1.0 μg/mL LPS干预转染后的细胞24 h, RT-qPCR法检测细胞中CircRNA ANKRD36和miR-127-5p的表达情况, 流式细胞术检测细胞凋亡, 蛋白印迹法检测细胞中Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平, DCFH-DA探针法检测ROS水平, 硫代巴比妥酸法检测细胞中MDA含量, 黄嘌呤氧化酶法检测细胞中SOD活性。此外, 用双荧光素酶报告基因实验验证了CircRNA ANKRD36和miR-127-5p的调控关系。结果显示, LPS可促进血管内皮细胞中CircRNA ANKRD36的表达(P<0.05), 而抑制miR-127-5p表达(P<0.05); 下调CircRNA ANKRD36或上调miR-127-5p可降低LPS诱导的血管内皮细胞凋亡率、细胞中Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平、ROS水平及MDA含量(P<0.05), 提高细胞中SOD活性(P<0.05)。CircRNA ANKRD36可靶向结合并负调控miR-127-5p。下调miR-127-5p可逆转下调CircRNA ANKRD36对LPS诱导的血管内皮细胞凋亡及氧化应激的影响。这提示, 下调CircRNA ANKRD36可能通过靶向上调miR-127-5p抑制LPS诱导的血管内皮细胞凋亡及氧化应激反应, CircRNA ANKRD36/miR-127-5p轴可能为脓毒症的治疗提供了新的分子靶点。