抑制Notch信号通路联合沉默Id1对骨肉瘤恶性生物学行为及成骨分化的影响

陈洁张瑶谢圣男周红罗庆^*

(重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所, 国家儿童健康与疾病临床医学研究中心(重庆), 儿童发育疾病研究教育部重点实验室, 儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地, 儿科学重庆市重点实验室, 重庆 400014)

摘要 :

该研究探讨了抑制Notch信号通路联合沉默Id1对人骨肉瘤细胞MG63的恶性生物学行为及成骨分化的影响。采用Notch信号通路抑制剂DAPT、沉默Id1重组腺病毒分别或联合处理MG63细胞, 采用Western blot检测分组处理MG63细胞后Notch1、Jagged1、Id1蛋白的表达; CCK8检测分组处理后MG63增殖能力; 流式细胞术检测分组处理后MG63细胞凋亡水平; 划痕实验和Transwell检测分组处理后MG63细胞迁移和侵袭能力; 碱性磷酸酶、茜素红染色分别检测分组处理后MG63细胞早期、晚期成骨分化能力。结果表明, DAPT处理MG63细胞后, Notch1、Jagged1蛋白表达下调(P<0.05), 可有效抑制MG63细胞中Notch信号通路活性; 抑制MG63细胞中Notch信号通路后Id1蛋白水平表达下降, 抑制MG63细胞中Notch信号通路联合沉默Id1后Id1蛋白表达水平最低(P<0.05); 抑制MG63细胞中Notch信号通路后细胞增殖、迁移、侵袭能力下降, 凋亡水平增加和早期成骨分化能力减弱(P<0.05); 抑制MG63细胞中Notch信号通路联合沉默Id1后细胞增殖、迁移、侵袭能力进一步减弱, 凋亡水平最高, 早期、晚期成骨分化能力增强(P<0.05)。综上所述, 抑制Notch信号通路可减弱MG63细胞恶性; 抑制Notch信号通路联合沉默Id1后可进一步减弱MG63细胞恶性, 促进其成骨分化。