circCALN1/miR-143-3p/BCL-2调控轴影响鼻咽癌细胞增殖与侵袭的分子机制研究

该文探讨circCALN1(circular RNA calneuron 1)在鼻咽癌中的表达及调控分子机制。运用生物信息软件预测circCALN1调控的miRNA及miRNA调控的靶基因; 运用RT-PCR检测鼻咽癌组织及细胞株中的基因表达水平; 常规培养鼻咽癌细胞株(CNE1、HNE1、SUNE-1、5-8F、6-10B), 鼻咽永久上皮分化细胞株NP69, 人肾小管上皮细胞株293T; 设计针对circRCALN1接头处的及BCL-2的siRNA序列, 运用脂质体转染细胞株; Transwell检测细胞侵袭能力; MTT检测细胞增殖抑制率; Western blot检测蛋白的相对表达水平; 构建双荧光报告基因载体验证基因之间的结合作用。circCALN1、BCL-2在鼻咽癌组织及细胞株的相对表达水平上调, 而miR-143-3p表达水平下调; 其中, 在CNE1、HNE1、SUNE-1、5-8F细胞株中, circCALN1、BCL-2在CNE1细胞株的表达水平最高, 而miR-143-3p在CNE1细胞株的表达水平最低; 有效降低circCALN1、BCL-2在鼻咽癌细胞株CNE1的表达水平24、48、72 h之后, 抑制率分别为(16.3±1.65)%、(29.6±2.6)%、(63±3.6)%; (26.3±2.9)%、(32.6±3.8)%、(59.6±3.9)%; 过表达miR-143-3p 24、48、72 h之后, 抑制率为(9.6±3.6)%、(13.6±5.6)%、(36.8±2.3)%; 过表达miR-143-3p及降低circCALN1、BCL-2的表达, 其侵袭细胞个数分别为185±13、200±15、183±18; 生物信息学结果提示: miR-143-3p与circ-CALN1存在结合位点, miR-143-3p与BCL-2存在结合位点。circCALN1、BCL-2-3ʹUTR双荧光报告基因载体质粒与miR-143-3p mimics共转梁293T细胞, 荧光活性降低。降低circCALN1的表达促进miR-143-3p的表达上调， 而BCL-2的表达下调。circCALN1/miR-143-3p/BCL-2调控轴影响了鼻咽癌细胞的增殖与侵袭。