首页 > 过刊浏览 > 第42卷, 第5 期

NKCC1在慢性肾脏病大鼠主动脉纤维化中的作用研究


刘爽  刘怡晟  应思琦  潘林蓉  蒋更如*

(上海交通大学医学院附属新华医院肾内科, 上海 200092)
摘要 :

该文探讨了Na-K-2Cl协同转运蛋白1(Na-K-2Cl cotransporter 1, NKCC1)在慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)大鼠主动脉纤维化中的作用。采用5/6肾切除方法建立CKD大鼠模型, 尾套法测定大鼠血压, 脲酶法测定血清尿素氮(blood urea nitrogen, BUN), 肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐(serum creatinine, Scr); 利用苏木素–伊红(hematoxylin and eosin, HE)染色观察组织形态, Masson染色观察组织纤维化情况; 利用Real-time PCR、Western blot和免疫组织化学染色法检测大鼠肾脏和主动脉组织中NKCC1的表达; 体外培养大鼠主动脉内皮细胞(endothelial cell, EC), 通过免疫荧光实验观察细胞中I型胶原(Collagen-I, Col-I)、III型胶原(Collagen-III, Col-III)的表达, 利用Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin, α-SMA)、血小板–内皮细胞黏附分子(CD31)、钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达。结果显示, CKD大鼠的平均收缩压(systolic blood pressure, SBP)较术前和假手术组(sham)均明显升高(P<0.05), BUN和Scr显著高于sham组(P<0.05); CKD大鼠肾脏和主动脉组织损伤严重且纤维化明显, NKCC1的表达较sham组明显增加; 醛固酮(aldosterone)使EC中NKCC1、Col-I和Col-III增多, 间质细胞标志物α-SMA和vimen-tin上调, 内皮细胞标志物CD31和E-cadherin下调, 在此基础上用布美他尼(bumetanide)使NKCC1、 Col-I和Col-III减少, α-SMA和vimentin表达下降, CD31和E-cadherin升高。该研究表明, NKCC1可能通过增强内皮–间质转化(endothelial-to-mesenchymal transition, EndoMT)促进CKD主动脉纤维化。