自噬负性调节LPS诱导的猪主动脉瓣瓣膜间质细胞成骨样表型转换

该文主要研究自噬对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的瓣膜间质细胞成骨样表型转换的影响与机制。免疫组化检测钙化(3例)与正常人(3例)主动脉瓣膜标本中成骨、炎症、自噬相关指标的表达情况。LPS处理猪原代主动脉瓣膜间质细胞(porcine aortic valvular interstitial cells, pAVICs)(2~6代), Western blot检测成骨、炎症、自噬指标水平变化。自噬激动剂、抑制剂联合LPS处理pAVICs, Western blot检测自噬、成骨、炎症水平变化, 转染GFP-LC3病毒以观察自噬激活水平。NF-κB抑制剂联合LPS处理pAVICs, Western blot检测炎症、成骨水平变化。结果显示, 成骨指标(RUNX2、OPN)、炎症指标(p-NF-κB)、自噬指标(LC3、Beclin 1)在病变主动脉瓣膜标本中, 表达水平皆高于正常对照组; Western blot显示, LPS处理可引起pAVICs的成骨、炎症、自噬水平上调; 自噬抑制剂对LPS诱导的自噬激活有抑制作用, 对LPS诱导的成骨水平上调有促进作用; 自噬激动剂对LPS诱导的自噬激活有促进作用, 可明显抑制LPS诱导的成骨水平上调; NF-κB抑制剂可抑制LPS诱导的炎症, 成骨水平上调; 自噬激动剂、抑制剂可分别抑制与促进LPS诱导的炎症水平上调。结果表明, 自噬负性调节炎症刺激因素LPS诱导的瓣膜间质细胞成骨样表型转换, 可能是通过抑制炎症通路NF-κB发挥调节作用。