携带线粒体tRNAMet4435A>G突变的原发性高血压家系的线粒体功能研究

该研究通过构建携带突变的永生化淋巴细胞系, 探讨线粒体tRNAMet4435A>G突变(以下简称为m.4435A>G)对原发性高血压线粒体功能的影响。首先, 提取携带m.4435A>G家系中的静脉血中的淋巴细胞, 建立为永生化类淋巴细胞并设为突变组, 同时选取与家系相同G2a1单体型的正常永生化淋巴细胞为对照组; 其次, 对两组细胞进行tRNA稳态水平分析、tRNA氨基酰化分析、Western blot分析、ATP水平检测和线粒体膜电位等实验反映细胞线粒体功能状态。tRNA稳态水平结果显示, 经tRNALys、 tRNALeu(UUR)、 tRNAAla 和 tRNASer(UCN)标准化后, 突变组tRNAMet平均水平分别为对照组平均水平的57.3%(P=0.012)、62.1%(P=0.006)、53.9%(P=0.021)和50.2%(P=0.037); 此外, 突变组平均tRNA氨基酰化水平为对照组的70%(P=0.023)。异常的tRNAMet代谢会导致线粒体tRNA编码的多肽减少, 根据Western blot结果, 突变样本的MT-CO2(以下简称CO2)、 ATP6和ND3为对照样本的88.20%、 57.43%和53.92%, 并具有统计学差异。此外, m.4435A>G突变会造成细胞氧化呼吸链损伤, 造成细胞线粒体ATP和膜电位水平的降低。结合ATP水平检测结果, 突变组ATP水平平均为对照组的71.5% (P<0.001); 并且细胞线粒体膜电位水平显示, 突变组平均线粒体膜电位水平相比对照组降低38.5%(P