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E18胚胎大鼠皮层区离体神经元培养


王金鹏 张勇*    

北京大学基础医学院神经生物学系, 北京大学神经科学研究所, 教育部神经科学重点实验室,国家卫生健康委员会神经科学重点实验室, 北京 100083
摘要 :

神经元细胞体外培养, 尤其来自中枢神经系统内的细胞, 是研究神经退行性疾病发病机制、神经再生过程以及基因工程小鼠模型等重要的实验手段。E18胚胎大鼠皮层神经元体外培养技术, 主要包括前期圆玻片处理、皮层分离、细胞消化、铺种以及更换培养基等。结果发现, 该研究神经元细胞生长良好, 可维持生长至少20天。在神经元形态方面, 树突具有较多分支, 轴突在不同细胞间形成连接。通过免疫染色和共聚焦显微镜成像, 该研究可观察到树突棘结构。此外, 对培养的神经元进行转染实验发现, 转染后细胞状态良好, 转染效率在10%左右。综上, 神经元体外培养技术方法可以较好地培养神经元并能维持神经元正常发育生长。体外培养的神经元细胞可用于免疫组化、基因编辑以及实时成像研究。