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无血清培养HAb18细胞的生长代谢与抗体分泌特征


李 玲 米 力* 谢 丽 刘 蓉 冯 强 徐力青 陈志南*
第四军医大学细胞生物学教研室,西安710032
摘要 : 通过逐步降低血清浓度,HPLC氨基酸分析及正交实验筛选研制了HAb18杂交瘤细 胞的无血清培养基。对在该无血清培养条件下的细胞进行了计数,对培养上清液进行了葡萄糖、谷 氨酰胺、乳酸和氨浓度以及抗体分泌量和抗原结合活性测定,并对动力学参数进行了分析,结果 表明HAb18细胞在无血清培养条件下达到的最大细胞密度和抗体分泌量分别为0.91×10 6个/ml和43.8 mg/L; 细胞比生长速率较在有血清条件下稍有下降,而抗体合成速率提高(0.0207/h比0.0218/ h,0.387 pg/cell/h比0.218 pg/cell/h,P<0.01)。无血清培养时葡萄糖和谷氨酰胺消耗无明显变化, 但乳酸浓度降低,氨浓度升高;此外,分泌抗体的抗原结合活性增加。研究无血清培养条件下的 HAb18细胞生长代谢和抗体分泌特征可为建立HAb18无血清悬浮流加培养工艺打下基础。