人喉癌干细胞的培养鉴定及其增殖的抑制研究

喉癌发病率逐年上升, 常规化疗药物如顺铂(cisplatin, DDP)和盐酸阿霉素(doxorubicin hydrochloride, DOX)在杀伤喉癌细胞、减少远处转移和提高患者生存率方面至关重要, 但对肿瘤干细胞的杀伤效果欠佳。靶向性或选择性杀伤肿瘤干细胞, 有望提高化放疗敏感性, 减少癌症转移及复发。该文主要通过体外悬浮培养人喉癌干细胞(Hep2 sphere), 运用qRT-PCR、Western blot等实验方法检测Hep2 sphere相关因子的表达、细胞周期和耐药性等数据。结果显示, 其在一定程度上具备肿瘤干细胞样特征。克隆形成实验和细胞计数法检测得到的人喉癌干细胞增殖能力弱, 多处于静息状态G0/G1期。qRT-PCR结果显示, 在Hep2 sphere中CD44、ALDH、p-AKT、bcl2和p21表达显著上调, bax和AKT表达下调。Western blot也证实, 在Hep2 sphere中bax和AKT蛋白表达下调, bcl2、p21蛋白表达显著上调。MTT实验检测表明, 在不同化疗药物处理下, Hep2 sphere的细胞存活率明显高于Hep2; 在腺病毒ZD55-Trail处理下, Hep2的细胞存活率则明显高于Hep2 sphere。研究证明,悬浮培养的人喉癌干细胞具有喉癌干细胞特性; 腺病毒ZD55-Trail对人喉癌干细胞具有较强杀伤效果, 对分化的喉癌细胞影响较弱, DDP、Dox和5-Fu则相反。