靶向PSCA的缺氧诱导型CAR-T的构建及体外效能研究

朱秀秀¹ 王玲² 沈俊杰¹ 陈雪娇² 钱程^1*

¹浙江理工大学生命科学学院, 杭州 310018; ² 重庆精准生物产业技术研究院有限公司, 重庆 400000

摘要 :

该文针对肿瘤微环境中的缺氧环境, 利用缺氧相关的启动子, 设计和制备在缺氧环境中诱导表达靶向前列腺干细胞抗原(PSCA)的嵌合抗原受体修饰的T细胞(CAR-T), 研究缺氧条件下其嵌合抗原受体(CAR)的表达及对肿瘤细胞的体外杀伤作用。研究者通过基因合成缺氧启动子(5H1P)和CAR的DNA片段, 利用酶切方法将其插入到慢病毒载体中, 然后感染T淋巴细胞。在体外用CoCl2构建缺氧模型, 通过流式细胞术检测CoCl2未诱导组CAR有42%的弱阳性表达, 诱导后阳性率增加到84.4%, 且荧光强度显著增加。结果表明, 诱导组比不诱导对照组抗肿瘤效果更好。综上所述, 该实验成功构建了靶向PSCA的缺氧诱导型CAR-T, 使其在缺氧的环境中效能增强, 这为CAR-T在实体瘤的治疗方面提供了新的方案。