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华蟾素对胃癌细胞MKN-45细胞周期的影响


何孟奇1 邵淑丽1,2* 冯元1 焦凯贺1 张伟伟1,2 张珍珠1,2 崔婷婷1 李铁1    

1齐齐哈尔大学生命科学与农林学院, 齐齐哈尔 161006;2抗性基因工程与寒地生物多样性保护黑龙江省重点实验室, 齐齐哈尔 161006
摘要 :

该研究的目的在于研究不同浓度华蟾素对人胃癌MKN-45细胞增殖及细胞周期的影响, 分析其可能的分子机制。通过锥虫蓝拒染法检测华蟾素对细胞增殖的影响, 激光共聚焦显微镜下观察细胞形态, 流式细胞术检测细胞周期, qRT-PCR和Western blot分别检测细胞周期调控因子CCND1和CCNB1基因mRNA和蛋白表达情况。结果显示, 在一定浓度范围内, 华蟾素对人胃癌MKN-45细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性。华蟾素作用人胃癌MKN-45细胞24 h、48 h和72 h的IC50值分别为102.797 μg/L、68.939 μg/L、60.563 μg/L。不同浓度的华蟾素作用人胃癌MKN-45细胞48 h后, 显微镜下MKN-45细胞出现明显的凋亡形态, G1期细胞所占比例降低, S期细胞所占比例逐渐升高, 细胞被阻滞在S期。细胞周期调控因子CCNB1和CCND1 mRNA和蛋白表达水平显著降低。综上所述, 华蟾素可以诱导细胞凋亡, 阻滞细胞周期并抑制MKN-45细胞殖。