脂多糖对新生小鼠肺血管内皮细胞的影响及机制探讨

摘要 : 该文旨在探讨脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)对新生小鼠肺血管内皮细胞的影响及 机制。将分离培养的肺血管内皮细胞随机分为空白对照组和LPS组; 用10 μg/mL的LPS处理细胞 后分别于0 h、6 h、12 h、24 h、48 h时间点收集细胞标本进行检测; 采用划痕实验观察LPS对肺 血管内皮细胞迁移的影响; 用荧光定量PCR(Real-time PCR, RT-PCR)检测白介素-1β(IL-1β)、巨噬 细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA水平 变化; Western blot检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)及核因子 κB(nuclear factor kappa-B, NF-κB)相关蛋白P65水平的变化。结果显示, 体外分离培养的肺血管内 皮细胞成鹅卵石样排列, VIII因子相关抗原和CD31表面抗原荧光染色阳性。划痕实验中, LPS组细 胞在12 h的迁移高于对照组(P<0.001); 荧光定量PCR检测到LPS组分泌的炎症因子IL-1β、TNF-α 和趋化因子MIP-1α、MCP-1的mRNA表达明显高于对照组(P<0.001); Western blot显示, LPS组与 对照组相比, VEGF蛋白表达在24 h、48 h处降低(P<0.05), VEGFR2蛋白表达在各时间段都明显降 低(P<0.001), 同时, NF-κB相关蛋白P65活性显著升高(P<0.05)。研究表明, 脂多糖诱发的炎症反应 影响肺血管内皮细胞的发育, 其机制可能与NF-κB通路激活, 诱导炎症因子、趋化因子表达升高和 VEGF/VEGFR2表达下降及有关。