ILP-2表达上调减轻双氧水诱导的人MCF-7细胞株凋亡

摘要 : 为探讨乳腺癌细胞生长中凋亡抑制蛋白样蛋白2(ILP-2)对活性氧(ROS)毒性的拮抗 作用, 该研究用不同浓度双氧水(H2O2)对人乳腺癌细胞MCF-7进行氧化应激造模, 2′,7′-二氯荧光黄 双乙酸盐探针法(DCFH-DA)检测乳腺癌细胞中活性氧变化, 蛋白质印记法检测siRNA干扰效率及 干扰后乳腺癌细胞ILP-2的表达, 噻唑蓝(MTT)法检测siRNA转染及双氧水处理后乳腺癌细胞的增 殖活性, 划痕试验分析siRNA转染及双氧水处理对乳腺癌细胞迁移的影响, 吖啶橙/溴化乙锭双荧 光染色法(AO-EB)检测siRNA转染及双氧水处理对乳腺癌细胞凋亡的影响。结果显示, 200 μmol/L 双氧水显著诱导MCF-7中活性氧的产生。蛋白质印迹法结果显示, siRNA-5干扰效率较高; 双氧水 +siRNA-5组ILP-2表达高于双氧水+siRNA阴性对照组。双氧水处理细胞24、48和72 h后, MTT结 果显示, 细胞存活率明显低于空白对照组, 双氧水+siRNA-5组细胞存活率高于双氧水+siRNA阴性 对照组; 划痕实验结果显示, 细胞迁移率低于空白对照组, 双氧水+siRNA-5组迁移率高于双氧水 +siRNA阴性对照组; AO-EB结果显示, 与空白对照组相比, 双氧水组细胞凋亡率显著升高, 双氧水 +siRNA-5组细胞凋亡率低于双氧水+siRNA阴性对照组。以上结果表明, 凋亡抑制蛋白ILP-2拮抗 活性氧对乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性, 促进细胞增殖。