莱茵衣藻IFT22蛋白的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备

薛斌1,2,3,4 王高飞1 潘强1 李淑婷1 王昊1 李晓瑾1 樊振川1,2,3,4*

1天津科技大学食品工程与生物技术学院, 天津 300457; 2天津科技大学大健康生物技术研究所, 天津 300457; 3天津市大健康生物技术国际联合研究中心, 天津 300457; 4天津科技大学大健康生物技术国家国际科技合作基地, 天津 300457

摘要 : 纤毛内运输蛋白IFT22是IFT复合物B中(IFT-B)的一个重要组分, 但对其功能研究存在很大的争议, 为深入研究IFT22功能, 制备一支特异性好的IFT22抗体是必不可少的。该研究首先用纯度为93%的6×His标签IFT22抗原免疫新西兰大白兔, 采集3次免疫后血清, 间接ELISA法测定效价为1׃64 000。抗血清经Protein A和抗原抗体纯化后, Western blot检测结果表明, 以Chlamydomonas reinhardtii CC125全细胞为抗原时, 孵育IFT22抗体后, 只有一条带出现, 说明anti-IFT22特异性非常好, 是研究IFT22蛋白功能的绝佳材料。